ارزیابی کمی و بهینه سازی تشخیص dna آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه خون با استفاده از تکنیک real time pcr

Authors

مجتبی نبیلی

m nabili طاهره شکوهی

t shokohi department of parasitology & mycology, faculty of medicine, çellular and molecular research çenter, mazandaran üniversity of medical sciences, sari, ïranساری: کیلومتر 18 جاده خزرآباد، دانشکده پزشکی، گروه انگل شناسی و قارچ شناسی سیدمحمدباقر هاشمی سوته

m.b hashemi soteh قاسم جانبابایی

gh jan babaie سیدرضا عقیلی

abstract

سابقه و هدف: آسپرژیلوزیس مهاجم عفونت فرصت طلب جدی ناشی از گونه های مختلف قارچ آسپرژیلوس است که اغلب در افراد دارای نقص سیستم ایمنی رخ می دهد. اساسا، تشخیص سریع و زودرس آن، از پیشرفت این عفونت قارچی جلوگیری بعمل می آورد. هدف از این مطالعه تعیین کمی و بهینه سازی dna آسپرژیلوس فومیگاتوس در خون با استفاده از تکنیک real time pcr بود.مواد و روش ها: پنج میلی لیتر خون داوطلب سالم را با رقت های مختلفی از کونیدی های آسپرژیلوس فومیگاتوس (106 تا 101) آلوده شد. استخراج dna از خون با استفاده از گلوله شیشه ای و کیت qiamp dna blood mini kit انجام شد. پرایمر و پروب های هیبریدیزاسیون برای تکثیر سکانس های اختصاصی گونه متعلق به ژن18s rrna آسپرژیلوس فومیگاتوس طراحی و با استفاده از روشreal time و تکنیک fret مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: تمامی واکنش های pcr با dna دیگر گونه های قارچی منفی بودند که نشان دهنده اختصاصیت 100 درصد این روش بود. آنالیز دمای ذوب آسپرژیلوس فومیگاتوس تنها در یک نقطه حداکثر سیگنال دمایی را با پروب در دمای 69.16 c نشان دادکه به تشخیص آسپرژیلوس فومیگاتوس کمک می کند. حداقل مقدار dna (100fg) cfu 110 معادل 10 کونیدی یا سلول در هر واکنش pcr مشخص گردید که نشان دهنده حساسیت بالای این روش می باشد.استنتاج: روش real time pcr با بکارگیری پروب های هیبریدیزاسیون دارای اختصاصیت و حساسیت بالا برای اندازه گیری بار قارچی جهت تشخیص زودرس و مانیتورینگ درمان می باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ارزیابی کمی و بهینه سازی تشخیص DNA آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه خون با استفاده از تکنیک Real time PCR

Background and purpose: Ïnvasive aspergillosis (ÏÂ) is a serious opportunistic infection caused by various species of Âspergillus in immnucompromissed individuals. Basically, rapid and early diagnosis prevents ÏÂ progression. The purpose of this study was to quantify and optimize detection of Âspergillus fumigatus DNÂ in blood samples using Real Time PÇR. Materials and methods: Five millil...

full text

تشخیص سریع سندرم تریزومی 21 با استفاده از تکنیک Real-time PCR کمی

سابقه و هدف: پیشگیری از تولد بیماران مبتلا به سندرم داون (تریزومی 21) از اولویت های وزارت بهداشت می باشد. هدف این مطالعه، تشخیص سریع بیماران مبتلا به سندرم داون با استفاده از تکنیک Real-time PCR کمی به منظور پایه گذاری روشی جدید برای تشخیص قبل از تولد است.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، ابتدا از افراد مورد مطالعه نمونه خون گرفته شد. پس از استخراج DNA ژنومی، میزان ژن DYRK1A2 در لنفوسیت های افراد...

full text

تشخیص کمی میزان تقلبات بافتهای طیور در پودر ماهی با استفاده از تکنیک real-time pcr

تغذیه و امنیت غذایی بی شک یکی از مهمترین موضوع های مورد بحث دنیای امروز و سازمان تجارت جهانی است. با توجه به ارتباط مستقیم بین سلامت خوراک دام با سلامت غذای انسان، ضرورت دارد که تولید خوراک دام به عنوان حلقه ای از زنجیره ی تولید غذای انسان مورد توجه قرار گیرد. در این تحقیق پرایمر با طول bp 91 از منطقه 12s rrna میتوکندریایی طراحی و blast گردید و بررسی صحت آن با استفاده از نرم افزار clc انجام گرف...

15 صفحه اول

تشخیص سریع سندرم تریزومی ۲۱ با استفاده از تکنیک real-time pcr کمی

سابقه و هدف: پیشگیری از تولد بیماران مبتلا به سندرم داون (تریزومی 21) از اولویت های وزارت بهداشت می باشد. هدف این مطالعه، تشخیص سریع بیماران مبتلا به سندرم داون با استفاده از تکنیک real-time pcr کمی به منظور پایه گذاری روشی جدید برای تشخیص قبل از تولد است.روش بررسی: در این مطالعه تجربی، ابتدا از افراد مورد مطالعه نمونه خون گرفته شد. پس از استخراج dna ژنومی، میزان ژن dyrk1a2 در لنفوسیت های افراد...

full text

بهینه سازی روش HRM-Real Time PCR برای تشخیص کرم قلب

مطالعه اکولوژی انگلهای سگ های ولگرد از اهمیت زیادی برخورداراست. باتوجه به  امکان انتقال انگل های مشترک از سگ های ولگرد به انسان، این انگل ها از جمله خطرات بالقوه جوامع انسانی امروز محسوب می شود که نیاز به مطالعات جامع دارد. دیروفیلاریا ایمیتیس انتشار جهانی دارد و ایران یکی از مناطق اندمیک برای این آلودگی است.ازاین رو، تحقیق حاضر با هدف بررسی آلودگی به دیروفیلاریا ایمیتیس در سگ ها ی ولگرد استان ...

full text

تشخیص کمی تقلب بافت طیور در سوسیس و کالباس گاوی با استفاده از تکنیک real- time pcr

متاسفانه در سالهای اخیر تقلبات در تولید مواد غذایی افزایش چشمگیری داشته است و شناسایی بقایای بافتهای دامی در مواد خوراکی اهمیت روزافزونی یافته است. لذا تشخیص اختصاصی گونه ها و شناسایی گروه های حیوانی مورد استفاده در مواد غذایی امری ضروری می باشد. به دلیل حضور dna در همه سلول ها، می توان جهت تشخیص گونه حیوانی از آن استفاده کرد. یکی از بهترین راه های تشخیص تقلب در مواد غذایی استفاده از روشهای مول...

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران

جلد ۲۰، شماره ۸۰، صفحات ۳۴-۴۳

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023